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骨髓细胞学检测
骨髓细胞形态学检查的临床应用
⒈确诊某些造血系统或非造血系统疾病
特征性细胞形态改变
各类白血病 AA 恶性组织细胞增生症 MA 多发性骨髓瘤 IDA 霍奇金病R-S细胞 戈谢(Gancher)病 NHL骨髓浸润 尼曼-匹克病 骨髓转移癌 海兰组织细胞增生症 疟疾 黑热病
⒉辅助诊断某些造血系统疾病 骨髓造血功能改变为主 溶血性贫血(HA) 血小板减少性紫癜 骨髓增生异常综合征(MDS) 骨髓增殖性疾病(MPD) 真性红细胞增多症(PV) 原发性血小板增多症(ET) 原发性骨髓纤维化(MF)一、血细胞的生成
造血干细胞(Stem Cell)功能特点: 具有高度自我更新的能力; 具有多向分化的能力; 具有自我复制的能力
二、血细胞发育过程中形态学演变的一般规律 (从原始到成熟)
1、细胞体积 胞体由大到小,巨核细胞例外 形态由圆形、椭圆形到不规则形 (巨核细胞、单核细胞) 2、细胞质 量:由少到多(淋巴细胞例外) 染色:由深到浅 颗粒:从无到有(红系例外)3.细胞核 大小:由大到小,规则到不规则(巨核细胞例外) 染色质:细致疏松到粗糙致密,着色浅到深 核仁:由有到无 核膜:由不明显到明显 4.核浆比 由大到小
骨髓涂片检查的步骤:(一)低倍镜检查1、确定取材和涂片是否满意 肉眼观察片尾部是否有骨髓小粒和脂肪滴, 镜下观察骨髓特有的各系幼稚细胞和巨核细胞 观察染色是否良好2、判断骨髓增生程度 以骨髓中有核细胞的数量来反映 一般直接在低倍镜下观察骨髓有核细胞与成熟红细胞比例⒊观察巨核细胞
数量:低倍镜 成熟程度:油镜分类
4.异常细胞
异常组织细胞 转移癌细胞 Gaucher细胞 Niemann-Pick细胞㈡油镜下检查
1.有核细胞计数、分类 G:E=2~4:1 巨核细胞计数、分类 ⒉观察细胞形态: 异常细胞,寄生虫 ⒊粒系总数各阶段形态比例⒋红系总数各阶段比例形态
⒌淋巴细胞系统各阶段比例形态⒍注意单核细胞比例形态7.浆细胞比例形态(三)检查结果的临床意义
1.骨髓增生的程度 (1)增生极度活跃 (有核细胞占全部细胞的50%以上) 反映骨髓造血功能亢进,常见于白血病,尤其是CML (2)增生明显活跃 (有核细胞占全部细胞的10%以上) 反映骨髓造血功能旺盛,见于各种增生性贫血、白血 病、骨髓增殖性疾病、ITP等,以及正常儿童和青年 的骨髓象。(3)增生活跃 (有核细胞占全部细胞的1%~10%) 反映骨髓造血功能基本正常,见于正常人骨髓象,也可见于增生性贫血、部分慢性AA,骨髓有局灶性代偿性增生者。 (4)增生减低 (有核细胞占全部细胞的0.5%~1%) 反映骨髓造血功能减低,见于AA(慢性型)、粒细胞减少或缺乏、骨髓纤维化,也可见于老年人骨髓象。 (5)增生明显减低 (有核细胞占全部细胞的0.5%以下): 反映骨髓造血功能衰竭,见于AA(急性型)、骨髓纤维化坏死等。 2.正常骨髓象 (1)粒细胞系统:约占有核细胞的50%~60%。一般原粒细胞<1%,早幼粒细胞<5%,中幼粒、晚幼粒细胞约<15%,杆状核粒细胞>分叶核粒细胞,E<5%,B<1%,大多为成熟型。 (2)红细胞系统:幼红细胞约占有核细胞的20%,原红细胞<1%,早幼红细胞<5%,以中、晚幼红细胞为主,各占10%左右。 G/E:粒细胞系的百分数除以红细胞系的百分数即为粒红比例。参考值2~4:1
3.各系细胞比例改变的临床意义 G/E (1)G/E正常见于: ①正常骨髓象; ②G、E细胞平等增多或减少,如红白血病,AA ③G、E细胞基本不变化的造血系统疾病,如MM、骨髓转移癌、ITP (2)G/E 增高 (>5:1)粒系增多或红系减少 ①AL/CL ②急性化脓菌感染、中性粒细胞类白血病反应 ③纯红AA (3)G/E 减少 (<2:1) 红系增多,或粒系减少 ①粒系减少,如粒细胞缺乏症; ②红细胞系增多,如各种增生性贫血、 真性或继发性红细胞增多症
(四)血涂片的观察 与骨髓片同时观察,一般分类计数100个白细胞,有核细胞的数量及所属阶段及血小板的形态数量有无异常单独描述 三、血细胞的细胞化学染色 (一)POX染色 结果 胞质中无蓝黑色的颗粒 阴性反应 出现小颗粒、分布稀疏 弱阳性反应 颗粒粗大而密集 强阳性反应 临床意义 AML+ AMOL+/- ALL- 主要用于AML和ALL的鉴别 表4-2-10 几种常见急性白血病的细胞化学染色结果NAP 成熟的中性粒细胞(分叶核与杆状核) 阳性 阳性反应细胞分级、积分。 一般计数100个成熟中性粒细胞计算积分及阳性率 参考值 成人阳性率10%~40%,积分40~80分 各实验室有自己的标准NAP临床意义 NAP活性受年龄、性别、应激状态、月经、妊娠等因素影响。主要用于 (1)感染性疾病 急性化脓菌感染NAP增高、病毒感染正常或略低。 (2)CML时NAP明显降低,积分可为0。类白血病反应时NAP增高。 (3)AML时NAP降低,ALL时NAP增高,AMOL时一般正常或减低。 (4)AA时NAP增高;PNH时减低。 (5)其他 恶性淋巴瘤、CLL、MPD如PV等NAP中度增高,恶组时NAP降低。 (6)腺垂体或肾上腺皮质功能亢进NAP可增高铁染色 结果 (1)细胞外铁 指贮存在骨髓小粒中单核-吞噬细胞系统内的铁。骨髓小粒上见到浅蓝绿色均匀无形物质,或呈蓝色或深蓝色的小球状、粗颗粒状或蓝黑色的小块状物质。 按阳性反应的强度分级: - 骨髓小粒无蓝色显现(提示贮存铁缺乏) + 少量的铁颗粒 ++ 较多的铁颗粒和铁小珠 +++ 很多铁颗粒、小珠和少数兰黑色小块 ++++ 极多铁颗粒和小珠, 并有很多密集成堆的小块 细胞外铁++++细胞外铁+++细胞外铁++ (2)细胞内铁 正常幼红细胞(主要是晚幼红细胞)的细胞核周围可见到1~5个呈蓝色的细小铁颗粒。含有铁颗粒的幼红细胞称为铁粒幼红细胞。 计数100个幼红细胞,记录铁粒阳性的幼红细胞数,即为铁粒幼红细胞的百分率。 环状铁粒幼细胞:如含粗大深染的铁粒在10个以上,并环绕细胞核排列超过核周径的2/3以上的。参考值 细胞外铁 1+~2+ 细胞内铁 20%~60% 临床意义 缺铁贫时:细胞外铁(-),内铁常<15% 铁染色是可靠的诊断和观察疗效的方法 非缺铁贫如珠蛋白生成障碍性贫血、铁粒幼贫、 HA、MA、AA等,外铁增加,常>3+~4+ 铁粒幼细胞性贫血:铁粒幼细胞增多,环状铁粒幼细 胞占幼红细胞的15%以上 MDS(RAS):环状铁粒幼细胞占幼红细胞的15%以上骨髓细胞免疫学分型(二)